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本期《袁來如此》為系列文章《大分子生物分析概論》的第八篇，旨在根據(jù)已發(fā)表的文獻資料，初步介紹LBA中的質(zhì)量控制樣品（QC，quality control）制備、認(rèn)證（qualification）和批次一致性維護的相關(guān)概念和實踐。由于內(nèi)容篇幅較長，本文將采取上下篇形式進行推送，敬請垂注！《袁來如此》專欄系廣州博濟醫(yī)藥微信公眾號打造的科普學(xué)術(shù)專欄，內(nèi)容均為博濟醫(yī)藥子公司深圳博瑞副總經(jīng)理袁智博士原創(chuàng)。1.導(dǎo)論配體結(jié)合測試方法（LBA）的性能，在研究前方法驗證和研究中樣本分析期間，體現(xiàn)在QC的效能。需要采用嚴(yán)格和既定的方法合理地管理QC樣品的生命周期，內(nèi)容包括制備、質(zhì)量控制以及QC性能的監(jiān)控。雖然在監(jiān)管機構(gòu)的指南和有關(guān)LBA的文獻中有關(guān)于QC樣品的制備和認(rèn)證接受標(biāo)準(zhǔn)（acceptance criteria）的相關(guān)討論，但此類文獻只是較為初步地討論了這些參數(shù)，且只涉及方法開發(fā)和研究前驗證的階段，并沒有對QC生命周期管理的問題和對這一過程至關(guān)重要的因素做出討論和解答。關(guān)于新QC批次的生產(chǎn)和認(rèn)證（用來保持QC批次間的一致性和防止測試結(jié)果偏移）的許多問題仍然沒有得到解決。此外，大多數(shù)生物分析實驗室缺乏健全的方法或統(tǒng)計工具來監(jiān)測QC趨勢，而這種監(jiān)測對于QC性能以及生命周期的管理是至關(guān)重要的。本文旨在填補這一方面的空白，為QC樣品生命周期的管理及其組成部分提供指導(dǎo)、建議和最佳實踐。這其中包括：QC的制備、認(rèn)證和其性能趨勢的監(jiān)控。幫助生物分析實驗室，在其標(biāo)準(zhǔn)操作程序 （SOPs）中，定義QC的認(rèn)證，并制定批次間一致性的指導(dǎo)原則。應(yīng)當(dāng)在已驗證的分析方法或每個實驗室的樣本分析計劃中，對研究和分析方法特異性的具體要求（assay- and study-specific requirements）和規(guī)范加以考慮和做出詳細(xì)說明。本文主要側(cè)重于用于LBA定量和定性分析中的QC，如藥代動力學(xué)（PK）和抗藥物抗體（ADA）的測試。其他類別的測試方法不在討論的范疇。2.質(zhì)量控制樣品的制備標(biāo)準(zhǔn)品（Reference standard）、混合樣本基質(zhì)、QC的組成成分、設(shè)備和生產(chǎn)策略都是制備用于LBA的QC樣品的關(guān)鍵因素。以下各節(jié)將根據(jù)這些因素展開討論。質(zhì)量控制樣品（Quality Controls）的構(gòu)成（composition）QC樣品應(yīng)使用與研究樣本基質(zhì)相似，且盡可能與其接近的基質(zhì)來制備。例如，如果研究樣本是未過濾、未離心或未經(jīng)活性炭處理的血清，則QC基質(zhì)也應(yīng)是未過濾、未離心或未經(jīng)活性炭處理的同一物種的血清。應(yīng)使用未稀釋（100%）的基質(zhì)制備QC樣品，以便對QC樣品與研究樣本采取相同的稀釋步驟[如最低稀釋度（minimum required dilution，MRD）]。但不排除特殊情況，例如用替代基質(zhì)代替稀有的研究基質(zhì)（通常很難獲得足夠數(shù)量的稀有基質(zhì)包括：腦脊液、關(guān)節(jié)腔滑液或來自某些物種的眼部基質(zhì)（ocular matrices）等），但這需要適當(dāng)?shù)睦碛?，并且只允許在需要保留基質(zhì)（matrix conservation）的情況下使用。緩解基質(zhì)體量問題的推薦方法是在替代基質(zhì)中準(zhǔn)備3個QC水平中的2個，而在研究基質(zhì)中制備一個濃度的QC。如果使用替代基質(zhì)，則需要證明其與研究基質(zhì)具有等效性。最好使用與制備標(biāo)準(zhǔn)品（calibrators）相同批次的基質(zhì)來制備QC樣品，以增強方法的一致性和重現(xiàn)性。中間原液（intermediate stock）是用于制備QC樣品的待測物溶液，可以在下列稀釋劑中制備，如水、緩沖液或有機介質(zhì)（organic media）。當(dāng)中間原液是水或緩沖液時，QC的最終成分至少為95%（v/v）的樣本基質(zhì)；當(dāng)使用有機溶劑（如DMSO或乙酸）制備時，最終成分至少為99%（v/v）的樣本基質(zhì)。QCs的獨立制備應(yīng)當(dāng)分別制備QC樣品與標(biāo)準(zhǔn)品，以防止加入待測物時的系統(tǒng)性誤差。建議使用不同的中間原液和不同的稀釋步驟來制備QC樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，還建議在每個濃度中獨立加入待測物，而不是通過序列稀釋（serial dilutions）高濃度的QC樣品。這一點尤為重要，因為標(biāo)準(zhǔn)品如果是通過高濃度樣品的序列稀釋制備的，序列稀釋QC樣品和標(biāo)準(zhǔn)品能夠掩蓋稀釋線性度的問題，應(yīng)該避免這種操作。標(biāo)準(zhǔn)品在QC制備時，PK定量分析中的標(biāo)準(zhǔn)品（reference standard）或ADA檢測中的陽性對照品（positive antibody control）必須在其有效期內(nèi)。應(yīng)該單獨建立QC樣品的穩(wěn)定性和有效期（與用于制備的標(biāo)準(zhǔn)品無關(guān)），因為QC樣品中的待測物是在基質(zhì)之中，與原液中的標(biāo)準(zhǔn)品是不同的?？梢灾苽?、分裝和儲存將標(biāo)準(zhǔn)品用研究基質(zhì)或適當(dāng)稀釋劑稀釋時所產(chǎn)生的中間原液，以供未來制備QC樣品或標(biāo)準(zhǔn)品。在這種情況下，中間原液的穩(wěn)定性應(yīng)覆蓋其儲存窗口期，即從其制備日期起至使用日期為止。這可以通過比較下述2種樣品來實現(xiàn)：1. 從凍存的中間原液（frozen intermediate stock）制備的標(biāo)準(zhǔn)品和/或QC樣品；2. 使用初始的標(biāo)準(zhǔn)品原液（original reference standard stock）制備的標(biāo)準(zhǔn)品和/或QC樣品。合格（Qualified）基質(zhì)正確地選擇用于制備QC樣品的基質(zhì)，對于保證分析方法的質(zhì)量和防止分析結(jié)果漂移是至關(guān)重要的。這在ADA檢測中尤其重要，因為合格的基質(zhì)（QMP），作為陰性對照（NC），將直接影響微孔板特異性的切點，必須在已驗證的定量分析方法中或適當(dāng)?shù)腟OP中，建立并明確規(guī)定適當(dāng)?shù)幕|(zhì)篩選（screening）、選擇（selection）過程以及接受標(biāo)準(zhǔn)。有關(guān)基質(zhì)質(zhì)量認(rèn)證（qualification）的建議總結(jié)如下。i. 第一個基質(zhì)的質(zhì)量認(rèn)證第一個合格基質(zhì)的批次認(rèn)證通常是作為分析方法開發(fā)的一部分進行的，并在方法驗證時進行正式的認(rèn)證。& 認(rèn)證足夠體量的合格基質(zhì)，足以在多個研究和多個藥物開發(fā)階段一直使用。至少，有足夠體量的合格基質(zhì)可以滿足研究前驗證以及一項或多項生物樣本分析研究。& 合格基質(zhì)的儲存條件與預(yù)期研究樣本的儲存條件一致（如-20℃或-80℃）。& 制備混合基質(zhì)（matrix pool）的第一步，是通過比較未添加和添加了待測物的基質(zhì)樣本所產(chǎn)生的分析信號，來篩選單個基質(zhì)樣本或混合基質(zhì)樣本（多個、單個樣本的混合物）。& 作為背景值，考察未添加待測物的基質(zhì)樣本的響應(yīng)值。應(yīng)當(dāng)將背景異常高的基質(zhì)樣本剔除，例如，高于PK定量下限（LLOQ）或高于ADA預(yù)估切點的樣本。對于ADA分析，背景異常低也可能有問題。& 對于PK定量分析，可根據(jù)分析方法或?qū)嶒炇襍OP中確定的接受標(biāo)準(zhǔn)來評估添加了待測物的基質(zhì)樣本。如建議相對誤差（RE）的接受標(biāo)準(zhǔn)在±20%范圍內(nèi)；建議在LLOQ和低QC(LQC)之間的濃度水平上添加待測物到單個基質(zhì)樣本，并且至少在一次分析運行中這樣做。& 對于ADA分析，必須強調(diào)空白信號（blank signal，NC）的重要性。當(dāng)沒有其它批次的基質(zhì)可比較時，建議在篩查測試(screen，Tier 1)中評估單個基質(zhì)樣本，并比較組內(nèi)各個樣本的響應(yīng)值，以評估其原始響應(yīng)值。應(yīng)將所有異常高響應(yīng)值或低響應(yīng)值的單個基質(zhì)排除在替換混合基質(zhì)（replacement matrix pool）之外。在可能的情況下，還應(yīng)將混合基質(zhì)（matrix pool）與一組疾病狀態(tài)的基質(zhì)樣本進行比較，以確定其合用性（suitability）。& 對于PK定量分析，混合基質(zhì)的背景的接受標(biāo)準(zhǔn)，可以是比預(yù)估的LLOQ低2-3倍的基質(zhì)響應(yīng)。ADA分析的接受標(biāo)準(zhǔn)，可以是低于預(yù)估的切點或在特定的響應(yīng)范圍內(nèi)。ii. 替換基質(zhì)批次的質(zhì)量認(rèn)證& 使用與認(rèn)證第一批次相同的分析方法，對替換批次的基質(zhì)樣本進行認(rèn)證。–確保未外加待測物的現(xiàn)有的和替換的合格基質(zhì)（QMP）的響應(yīng)值具有可比性。–對于PK定量分析，應(yīng)當(dāng)將替換基質(zhì)批次與現(xiàn)有合格批次進行比較。至少在一次分析運行中，分析添加了待測物標(biāo)準(zhǔn)品的樣本（濃度在LLOQ和LQC之間，至少n=3）。標(biāo)準(zhǔn)品（reference standard）的分析回收率(AR)，在現(xiàn)有和替代批次的基質(zhì)中，都應(yīng)在80至120%的范圍內(nèi)。同時，使用兩個基質(zhì)批次制備的樣本所測定的標(biāo)準(zhǔn)品濃度之差不超過10%。–為了認(rèn)證ADA分析中的替換合格基質(zhì)（replacement QMP），應(yīng)當(dāng)使用先前建立的微孔板特異的切點因子，對單個基質(zhì)樣本進行篩查。篩查測試中是陽性的所有單個樣本都應(yīng)排除在替換合格基質(zhì)之外。另一種方法是直接考察每個基質(zhì)樣本的信噪比(S/N)，應(yīng)將超過經(jīng)過驗證的切點因子的基質(zhì)樣本排除在替換合格基質(zhì)之外。以下推薦的是替換合格基質(zhì)的接受標(biāo)準(zhǔn): 替換基質(zhì)批次的響應(yīng)值，應(yīng)當(dāng)在現(xiàn)有基質(zhì)批次響應(yīng)值的±10%以內(nèi)。如果不是，則應(yīng)當(dāng)評估一組單個基質(zhì)樣本，并與兩個微孔板特異的切點比較，以確定篩查結(jié)果是陽性或陰性。其中一個切點是用現(xiàn)有合格基質(zhì)的陰性對照計算的，另一個切點是用替換合格基質(zhì)制備的陰性對照計算的。使用這兩個切點（現(xiàn)有vs.替換微孔板特異的切點）所得出的篩查結(jié)果（陰性/陽性狀態(tài)）應(yīng)當(dāng)相似（comparable），但borderline samples，根據(jù)基質(zhì)響應(yīng)，可能是陽性或陰性。iii. 基質(zhì)的背景響應(yīng)在PK分析中，基質(zhì)的背景響應(yīng)應(yīng)保持在最低狀態(tài)，因為它影響分析靈敏度，并可能限制定量的范圍。對于ADA分析，建議一旦獲得驗證數(shù)據(jù)，就應(yīng)盡快確定基質(zhì)響應(yīng)范圍的上限和下限。& 在非競爭性定量（如PK）免疫測試中，基質(zhì)背景不應(yīng)超過LLOQ的1/3。& 在競爭性免疫分析中，背景值至少為最低校準(zhǔn)點數(shù)值的1.11倍。這是基于B/B0（最低校準(zhǔn)點信號/零校準(zhǔn)點信號，lowest calibrator signal/zero calibrator）建議的90%（100/90）。& 在ADA和其他非定量分析中，對基質(zhì)背景的一般建議是相對發(fā)光單位（RLUs）≤200和吸光度≤0.200。有些測試方法的基質(zhì)背景則比上述建議的要高。& 基質(zhì)背景的下限由儀器響應(yīng)決定，不同儀器和不同實驗室的儀器響應(yīng)可能不同。設(shè)備& 用于制備QC樣品的設(shè)備，包括移液器，應(yīng)進行精密度驗證，并應(yīng)在校準(zhǔn)范圍內(nèi)。& 設(shè)備校準(zhǔn)的過程和頻率應(yīng)在SOP中規(guī)定明示。& 在一些實驗室，除了定期校準(zhǔn)之外，還需要在使用移液器制備QC樣品之前進行額外的校準(zhǔn)檢查，但在一些實驗室，如果定期校準(zhǔn)仍然有效，則不需要重新進行校準(zhǔn)檢查。3.QC樣品的認(rèn)證常規(guī)的運行接受標(biāo)準(zhǔn)（general run acceptance criteria）此處的一般運行接受標(biāo)準(zhǔn)適用于現(xiàn)有和替換QC批次的認(rèn)證。此處下列術(shù)語：基線批次（baseline QC lots）、遺留QC批次（legacy lots）或QC比較批次（comparator QC lots）可互換使用。對于PK定量分析方法1. QC樣品可與之前認(rèn)證過的，且有已知穩(wěn)定性的凍存校準(zhǔn)品進行比對和認(rèn)證。如果沒有合格的凍存標(biāo)準(zhǔn)品，則應(yīng)使用重新制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線對QC樣品進行評估。在后一種方法中，需要加入之前認(rèn)證過的一組QC樣品對新鮮制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行認(rèn)證。2. 認(rèn)證（qualification）是通過評估分析內(nèi)和分析間的精密度（inter- and intra-assay precision，對所有方法）和準(zhǔn)確度(對定量方法)來進行的。3. 對定量和藥代動力學(xué)分析方法，QC樣品必須滿足精密度和準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)：變異系數(shù)(coefficient of variation，CV) ≤20%，RE在±20%之內(nèi)；定量下限（LLOQ）和上限（ULOQ）：CV≤25%，RE在±25%之內(nèi)。對于ADA和其它定性分析方法：1. QC樣品應(yīng)滿足CV≤20%的標(biāo)準(zhǔn)。2. 現(xiàn)有和替換QC的響應(yīng)值都應(yīng)在其相應(yīng)濃度級別已建立的響應(yīng)范圍內(nèi)。如果替換的QC批次不在相應(yīng)的信號范圍內(nèi)，則實驗室必須排除故障并確定其根本原因。ADA陽性對照（PC）和陰性對照（NC）信號漂移的潛在原因包括：(a)待測物添加錯誤；(b) 混合基質(zhì)選擇不當(dāng)；(c)信號范圍設(shè)定不正確。后續(xù)的故障排除應(yīng)遵循以下順序: 首先準(zhǔn)備一個新批次的QC樣品，如果重復(fù)制備的QC仍然失敗，則認(rèn)證一個新批次的合格基質(zhì)（QMP）；然后重新制備陽性和陰性對照，如果新制備的陽性和陰性對照仍然在其信號范圍之外，則納入研究中測試運行得出的額外數(shù)據(jù)，進而重新評估已建立的信號范圍。每個實驗室應(yīng)當(dāng)根據(jù)足夠的測試運行次數(shù)所得出的數(shù)據(jù)，適當(dāng)?shù)卮_定驗證后信號范圍，以避免將其范圍設(shè)置得過窄或者不適合長期使用。3. 接受標(biāo)準(zhǔn)：高陽性對照（HPC）>低陽性對照（LPC）>切點>陰性對照。對于所有分析方法1. 建議在每次認(rèn)證的測試運行中，至少測試3組現(xiàn)有和替換QC樣品。在這個要求上，個別實驗室可能會有所不同。2. 至少三分之二的測試運行應(yīng)滿足上述規(guī)定的接受標(biāo)準(zhǔn)。這些認(rèn)證要求和建議見表I。表1. 替換QC批次（replacement QC lots）認(rèn)證要求的比較3. 現(xiàn)有的和替換的QC樣品必須滿足上述的常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)。4. 如果替換批次的QC樣品不符合上述接受標(biāo)準(zhǔn)，而現(xiàn)有批次合格時，則應(yīng)將替換批次廢除，并制備另一批次的QC樣品。當(dāng)一個濃度水平的替換QC樣本不合格時，可以重新制備該濃度水平的QC。5. 如果現(xiàn)有的QC批次在替換批次的認(rèn)證過程中未能通過接受標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新分析以確認(rèn)相關(guān)結(jié)果。如果現(xiàn)有的批次在重復(fù)分析后仍然不合格，那么它就不能用作比對品（comparator）。在這種情況下，應(yīng)遵循<現(xiàn)有合格批次不存在時的認(rèn)證>章節(jié)所描述的程序和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。第一個批次QC樣品的質(zhì)量認(rèn)證第一個批次的QC樣品，也被稱為基線（baseline）或遺留（legacy）批次，通常作為研究前方法驗證中的準(zhǔn)確度和精密度（A&P）評估的一部分進行認(rèn)證。對研究前方法驗證中的QC批次進行認(rèn)證時，推薦至少進行獨立運行6次，每個QC濃度至少運行3次，至少分2天進行，至少2名分析人員參與。且要求至少4/6的QC認(rèn)證運行應(yīng)該滿足接受標(biāo)準(zhǔn)，才滿足對該批次QC認(rèn)證（見表1）。在可能的情況下，還建議將該QC批次與方法開發(fā)時所用的QC樣品建立橋接聯(lián)系。對這種橋接性評價的接受標(biāo)準(zhǔn)將由各個獨立的實驗室自行制定， 推薦二者之間的誤差為±10%或更低。特定樣品的運行接受標(biāo)準(zhǔn)必須滿足常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)。表1. 替換QC批次（replacement QC lots）認(rèn)證要求的比較。替換批次QC樣品的認(rèn)證i. 通過與現(xiàn)有合格QC批次比較的認(rèn)證在研究前的方法驗證之外，每次制備替換批次QC樣品時，通過與之前認(rèn)證了的（合格）批次的比較，對替換批次進行認(rèn)證。為了可靠地進行可比性評估，必須使用相同的凍存或新鮮制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線來評估現(xiàn)有的和替換的QC批次。一個替換批次的QC樣品至少要經(jīng)過2個獨立的認(rèn)證運行（qualification runs）。QC認(rèn)證運行可能在同一天由多個分析人員（至少2名），或同一分析人員在不同天（至少2天）進行。建議在同一認(rèn)證運行中，至少要包括3組獨立的替換批次QC樣品和至少3組現(xiàn)有批次的QC樣品。一組從單獨凍存和分裝的QC所制備的樣品被定義為一組獨立的QC樣品（一組有三個濃度級別）。在QC認(rèn)證過程中，不鼓勵在同一測試運行中使用同一凍存和分裝的QC制備的一組QC。個別實驗室可以制定不同于此處建議的標(biāo)準(zhǔn)，如根據(jù)其對所涉及的變異性和風(fēng)險的評估，分別進行3次獨立測試運行，而不是2次。定量LBA方法中，替換QC批次的認(rèn)證，應(yīng)當(dāng)以常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定為基礎(chǔ)，同時也應(yīng)當(dāng)以其與現(xiàn)有合格QC批次的可比性（comparability）為基礎(chǔ)。例如，可比性標(biāo)準(zhǔn)可包括現(xiàn)有批次和替換批次之間±10%或以下的差異。使用現(xiàn)有和替換QC樣品的測量濃度，可以用下面的公式確定差異百分比值（%）。替換批次濃度-現(xiàn)在批次濃度用于ADA和其他非定量LBA檢測方法, 現(xiàn)有和替換的QC批次都應(yīng)該滿足ADA和定性分析的常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)。此外，現(xiàn)有和替換PCs和NCs的響應(yīng)都應(yīng)該在各自建立的信號范圍內(nèi)。ii. 不存在現(xiàn)有合格（認(rèn)證過的）QC批次情況下的認(rèn)證可能存在這樣的情況，即可能不存在遺留的，經(jīng)認(rèn)證合格的QC樣品，因為這些QC樣品已經(jīng)用完或過期。不存在可比較QC的情況下，建議使用不同的中間原液（intermediate stocks），由不同的分析人員，分別制備兩個批次的QC樣品。從實際操作上，可以指定一個批次，可能是批量較大的，為主要批次（primary lot）；另一批次，可能是小批量的，就作為參照品（comparator），對主要批次進行認(rèn)證。對主要和次要批次的對比測試應(yīng)由2人進行，每人使用獨立制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行測試，每人進行3次測試，至少分2天進行，總共運行6次。至少4/6 (2/3)的QC認(rèn)證運行應(yīng)該滿足接受標(biāo)準(zhǔn)。也應(yīng)滿足上述的常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)。兩個替換批次的QC樣品應(yīng)滿足±10%或更嚴(yán)格的偏差標(biāo)準(zhǔn)，保證二者中任何一個批次均可接受。表1總結(jié)了這些認(rèn)證要求。在含有內(nèi)源性待測物的基質(zhì)中制備的QC的認(rèn)證在定量PK分析中，當(dāng)基質(zhì)中含有待測物的內(nèi)源性同源物時，所測定的空白基質(zhì)濃度可能是至關(guān)重要的；并應(yīng)該納入考慮。有2種方式：1.減法：在報告測定的QC值之前，從測定的QC樣品濃度中減去空白基質(zhì)的濃度；2.加法：將測定的空白基質(zhì)濃度加上QC的外加待測物濃度，以確定其調(diào)整后的標(biāo)稱值。Marcelletti等人介紹了幾個案例研究；其中，使用加法和減法，直接比較了加標(biāo)回收率；這些案例研究評估了具有明顯內(nèi)源性水平的許多生物標(biāo)記物的回收率。根據(jù)這些已發(fā)表的案例研究，減法是首選方法，而不推薦使用加法。建議在每個認(rèn)證運行中至少包含3組空白基質(zhì)樣本，其測定的平均濃度用于調(diào)整值（adjusted value）的計算。建議對含有內(nèi)源性待測物的QC樣品，在10-20天內(nèi)至少進行30次運行，至少有2人參與，每個運行使用≥3組QC樣品。此類QC認(rèn)證的運行接受標(biāo)準(zhǔn)與定量PK方法的常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)相同。未知標(biāo)稱濃度（Nominal Concentration）的QC的認(rèn)證如果QC原液的標(biāo)稱濃度未知，如未純化的蛋白質(zhì)和一些商業(yè)來源的對照原液（commercial control stocks），或者在血液學(xué)檢測中，當(dāng)crude血清/血漿被用作血液因子的來源時，標(biāo)稱濃度必須根據(jù)多位分析人員在不同日期進行的多次運行中檢測到的平均值來確定。此類測試的適當(dāng)規(guī)范是特異于測試方法的，必須作為研究前測試方法驗證的一部分建立起來。QC樣品的制備方法是將待測物原液，以特定稀釋倍數(shù)，加入到經(jīng)過認(rèn)證（合格）的空白混合基質(zhì)或適當(dāng)?shù)南♂寗╠iluent）中。對于所有成功的運行，每個QC的平均測定值就應(yīng)設(shè)定為標(biāo)稱值。建議至少正常實施測試運行30次，由至少2人在10-20天內(nèi)執(zhí)行，以設(shè)定QC樣品的標(biāo)稱濃度。每個測試運行包含 ≥3 組QC。在最初的測定之后，日常分析運行中QC樣品的接受標(biāo)準(zhǔn)以及將來替換QC批次的接受標(biāo)準(zhǔn)為已確定的標(biāo)稱值（nominal value）的±20%。任何替換批次的待測物濃度必須在此確定的范圍內(nèi)。由于來自血清和血漿的因子的固有的變異性，可能需要，基于最初的20-30次的運行數(shù)據(jù)，為每個QC濃度水平指定一個臨時的標(biāo)稱值；然后，在有其它可用數(shù)據(jù)時，重新評估這個標(biāo)稱值的適用性。如果測試方法的內(nèi)在變異性較大，則可能需要定期地重新評估和重新建立QC的接受范圍。前述的PK定量方法的常規(guī)運行接受標(biāo)準(zhǔn)也必須得到滿足。標(biāo)稱濃度與測定濃度單位不一致的QC的認(rèn)證酶活性測試方法是QC標(biāo)稱值和測定值單位不同的方法之一。在這些分析測試中，酶類藥物的標(biāo)稱(外加)濃度通常是ng/mL或?g/mL；然而，加標(biāo)QC樣品測定值的活性單位為nmol/h/mL或nmol/h/?g。這些QC單位上的差異構(gòu)成了獨特的挑戰(zhàn)，因為它不能計算準(zhǔn)確度。在這種情況下，可以通過建立QC的標(biāo)稱活性值（nominal activity value）來克服這個局限性。每個濃度級別的標(biāo)稱QC活性值可以，由至少2人，根據(jù)至少30次合格運行的平均測定活性值，在至少10-20天內(nèi)建立。每次運行至少應(yīng)包含3組QC樣品。所有合格運行的平均活性測定值，即為QC的標(biāo)稱活性值，并可以使用下面的公式計算單個QC樣品的%RE：其中，標(biāo)稱QC活性值m30，含義是進行30次運行所測定活性的平均值。在最初的測試完成之后，日常運行和替換QC批次的接受標(biāo)準(zhǔn)就是QC活性標(biāo)稱值的±20%。表2總結(jié)了上面討論的，有關(guān)特殊類別的QC樣品的注意事項。表2. 對特殊類別QC樣品的要求的總結(jié)特別聲明本文如有疏漏和誤讀相關(guān)指南和數(shù)據(jù)的地方，請讀者評論和指正。所有引用的原始信息和資料均來自已經(jīng)發(fā)表學(xué)術(shù)期刊, 官方網(wǎng)絡(luò)報道, 等公開渠道, 不涉及任何保密信息。參考文獻的選擇考慮到多樣化但也不可能完備。歡迎讀者提供有價值的文獻及其評估。擴展閱讀參 考 文 獻1. Azadeh, M., et al., Quality Controls in Ligand Binding Assays: Recommendations and Best Practices for Preparation, Qualification, Maintenance of Lot to Lot Consistency, and Prevention of Assay Drift. The AAPS journal, 2019. 21(5): p. 89.2. DeSilva B, et al. Recommendations for the bioanalytical method validation of ligand-binding assays to support pharmacokinetic assessments of macromolecules. AAPS J. 2003;20(11):1885–900.3. Viswanathan CT, et al. Quantitative bioanalytical methods validation and implementation: best practices for chromatographic and ligand binding assays. Pharm. Res. 2007;24(10):1962–73.4. US Food and Drug Administration. Guidance for industry: bioanalytical method validation. Silver Spring: Center for Drug Evaluation and Research; 2018.5. Azadeh M, et al. Calibration curves in quantitative ligand binding assays: recommendations and best practices for preparation, design, and editing of calibration curves. AAPS J. 2018;20:22.6. Nowatzke W, Woolf E. Best practices during bioanalytical method validation for the characterization of assay reagents and the evaluation of analyte stability in assay standards, quality controls, and study samples. AAPS J. 2007;9(2):F117–E122.7. Marcelletti JF, et al. Calculations for adjusting endogenous biomarker levels during analytical recovery assessments for ligand-biding assay bioanalytical method validation. AAPS J. 2015;17(4):939–47.8. US Food and Drug Administration. Guidance for industry: assay development and validation for immunogenicity testing of therapeutic protein products. Silver Spring: Center for Drug Evaluation and Research; 2019.9. U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration, Process validation: general principles and practices. Guidance for industries; 2011.10. Sondag P, et al. In: Zhang L, editor. Nonclinical statistics for pharmaceutical and biotechnology industries. Statistics for Biology and Health. Cham: Springer; 2016.p.415–32.11. Schofield T. Lifecycle approach to bioassay. In: Nonclinical statistics for pharmaceutical and biotechnology industries. Cham: Springer; 2016. p.433–60.12. Scherder T, et al. Continued process verification. In: Statistics for biotechnology process development. Boca Raton: Chapman and Hall/CRC; 2018. p. 265–84.13. Levey S, et al. The use of control charts in the clinical laboratory. Am J Clin Pathol. 1950;20(11):1059–66.14. Montgomery DC. Introduction to statistical quality control. 6th ed. Hoboken: Arizona State University, Wiley; 2009.15. Westgard JO. Interpreting SQC results using “Westgard Rules”. In: Westgard JO, editor. Basic QC practices, vol. 2016. 4th ed. Madison: Westgard QC; 1998. p. 45–58.16. Sullivan LP. Reducing variability: a replacement approach to quality. Qual Prog. 1984.17. Kelly M, et al. Large molecule run acceptance: recommendation for best practices and harmonization from the global bioanalysis consortium harmonization team. AAPS J. 2014;16(2):221–5.18. Parvin CA, et al. C24-A4. Statistical quality control for quantitative measurement procedures: principles and definitions. 4th ed. Wayne: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2016.19. Westgard JO. Statistical quality control procedures. Clin Lab Med. 2013;33(1):111–24.20. Geist B, et al. Monitoring quality of critical reagents used in ligand binding assays with liquid chromatography mass spectrometry. In: Protein analysis using mass spectrometry. Hoboken: Wiley; 2017. p. 107–23.
2021-05-31
5月24-26日，化學(xué)加網(wǎng)2021中國醫(yī)藥CMC產(chǎn)業(yè)鏈企業(yè)家科學(xué)家高峰論壇在廣州隆重舉行。中國科學(xué)院陳凱先院士、馬大為院士、中國工程院陳芬兒院士、暨南大學(xué)藥學(xué)院院長丁克、南方科技大學(xué)化學(xué)系系主任張緒穆、華東師范大學(xué)教授姜雪峰教授等數(shù)百名來自醫(yī)藥領(lǐng)域、企業(yè)界、學(xué)屆大咖齊聚一堂，分享研究成果，共謀產(chǎn)業(yè)未來。博濟醫(yī)藥董事長王廷春、副總經(jīng)理馬仁強、子公司美國漢佛萊首席運營官趙東受邀出席本次會議并發(fā)表演講及參與圓桌討論。在5月24日的分會場四中，馬仁強發(fā)表了名為《非臨床評價在新藥審評與投資中的應(yīng)用》演講，同與會者分享了動物實驗、藥理毒理研究等非臨床評價業(yè)務(wù)在新藥注冊和投資評估中的作用和價值。5月25日，趙東則以《中美雙報中的 CMC 考量》為題，在分會場向與會者重點談及了再生醫(yī)學(xué)在中美雙報CMC中的重要作用。5月26日，王廷春出席大會主會場并參與圓桌討論環(huán)節(jié)，同與會嘉賓共同圍繞如何尋找化學(xué)創(chuàng)新與藥物產(chǎn)業(yè)化升級之間的橋，生命科學(xué)原創(chuàng)性研究與生物醫(yī)藥如何產(chǎn)學(xué)研結(jié)合，復(fù)雜制劑的仿制藥開發(fā)以及納米制劑的開發(fā)，中國人體工程學(xué)、制劑學(xué)與發(fā)達國家的差距，大學(xué)藥學(xué)院與企業(yè)藥物研究院如何創(chuàng)新共享、合作發(fā)展等話題展開討論，與會嘉賓直抒胸臆，暢談己見，引得場下掌聲陣陣。
2021-05-27
昨日（5月20日），DIA 2021中國年會在蘇州國際博覽中心隆重舉行。博濟醫(yī)藥攜子公司美國漢佛萊、上海砝碼斯、蘇州旭輝檢測精彩亮相此次盛會。據(jù)介紹，本次DIA 2021中國年會將立足于新藥研發(fā)國際化和國內(nèi)創(chuàng)新的雙重趨勢，內(nèi)容全面聚焦監(jiān)管政策創(chuàng)新、科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新以及人才創(chuàng)新三大方向，攜手藥研領(lǐng)域眾多同仁們金雞湖畔再出發(fā)，12年歷程再看藥物研發(fā)全球化的傳承與創(chuàng)新。作為國內(nèi)知名CRO上市企業(yè)，博濟醫(yī)藥與子公司美國漢佛萊、上海砝碼斯、蘇州旭輝檢測的聯(lián)合展位在現(xiàn)場頗為亮眼。博濟醫(yī)藥深耕CRO領(lǐng)域近20年，致力于提供創(chuàng)新藥臨床研究、藥學(xué)研究、藥物評價、中美雙報、CDMO生產(chǎn)的一站式全流程研發(fā)外包服務(wù)。博濟醫(yī)藥相關(guān)負(fù)責(zé)人表示，博濟醫(yī)藥與子公司美國漢佛萊、上海砝碼斯、蘇州旭輝檢測聯(lián)合參展，充分向業(yè)界展示了自身在CRO外包服務(wù)與中美雙報方面的核心實力，令客商進一步了解了博濟醫(yī)藥在CRO領(lǐng)域的核心競爭力，為后續(xù)的交流合作奠定了良好的基礎(chǔ)。
2021-05-21
近期，廣東省藥品監(jiān)督管理局組織GMP認(rèn)證專家對博濟醫(yī)藥子公司廣州博濟生物醫(yī)藥科技園（下稱：博濟科技園）有限公司口服固體車間片劑生產(chǎn)線進行了為期四天的GMP符合性現(xiàn)場檢查，檢查結(jié)論為通過現(xiàn)場核查。這標(biāo)志著博濟科技園片劑生產(chǎn)線符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）要求，具備藥品上市生產(chǎn)能力，可為客戶提供優(yōu)質(zhì)的CDMO服務(wù)。經(jīng)過詳細(xì)全面的現(xiàn)場和文件體系檢查，專家組對博濟科技園GMP規(guī)范執(zhí)行情況有了全面了解，對博濟科技園目前的質(zhì)量管理及片劑生產(chǎn)管理表示認(rèn)可，整體評估認(rèn)為博濟科技園藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理體系完善，風(fēng)險可控，運行有效，最終順利通過片劑生產(chǎn)線的GMP符合性現(xiàn)場考核。檢查結(jié)論顯示，經(jīng)對廣州博濟生物醫(yī)藥科技園有限公司口服固體車間片劑生產(chǎn)線進行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范符合性檢查（編號：粵20210035），本次檢查范圍“片劑”符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》要求，同意該車間和生產(chǎn)線投入藥品上市生產(chǎn)。通過GMP符合性檢查，標(biāo)志著博濟生物醫(yī)藥科技園片劑生產(chǎn)線符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）要求，具備藥品上市生產(chǎn)能力。關(guān)于博濟生物醫(yī)藥科技園：博濟生物醫(yī)藥科技園位于廣州市增城國家經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)核心區(qū)內(nèi)，注冊資本1.22億元，占地面積33300㎡，園區(qū)規(guī)劃總建筑面積10萬㎡，建成后將擁有10000㎡的研發(fā)公共服務(wù)平臺，20000㎡的CDMO生產(chǎn)基地以及70000㎡的孵化場地。CDMO生產(chǎn)基地?fù)碛修k公大樓、口服固體制劑車間、液體制劑車間、中藥前處理和提取車間、化學(xué)原料藥合成車間以及消防、動力、污水處理站等配套設(shè)施。 藥物研發(fā)生產(chǎn)公共服務(wù)平臺（CDMO），已取得片劑、硬膠囊劑、顆粒劑、散劑、中藥前處理和提取、原料藥的生產(chǎn)許可證，可提供藥物工藝放大研究、臨床用藥生產(chǎn)、MAH落戶、中試和商業(yè)批生產(chǎn)、創(chuàng)新藥項目投融資等服務(wù)。 科技園已獲得廣州市科技企業(yè)孵化器生物醫(yī)藥專業(yè)孵化器登記認(rèn)定，擁有4大GMP中試平臺以及檢測中心，能為在孵企業(yè)提供專業(yè)化的實驗條件、中試和專業(yè)化的技術(shù)服務(wù)。建成后可容納創(chuàng)新型企業(yè)達140家，是目前增城唯一的生物醫(yī)藥領(lǐng)域?qū)I(yè)孵化器。未來，博濟生物醫(yī)藥科技園將成為增城區(qū)生物醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)桿，集研發(fā)、中試、生產(chǎn)一站式服務(wù)平臺，為增城區(qū)培育一批具有競爭力的生物醫(yī)藥創(chuàng)新企業(yè)。
2021-05-19
